統一糖化血紅蛋白檢測標準勢在必行

糖尿病是一種多病因的代謝疾病，具有慢性高血糖、伴隨因胰島素分泌不足或作用無效引起的糖、脂肪和蛋白質代謝紊亂，可導致不同臟器的(長期)損傷、功能障礙和衰竭。截至2003年，全球糖尿病患者數量已經接近2億，預測2005年會再增加一倍，使全球人群患病率從0.67%上升到2.3%。就中國而言，現在糖尿病患者已經達到4000萬，占全球糖尿病患者總數的1/5，目前我國每年用于治療糖尿病的直接醫療成本超過180億元人民幣，占全部醫療費用的4%。因此加強糖尿病的診斷與預防具有非常現實而重要的意義。

糖尿病檢測的主要指標
實驗室檢查是目前糖尿病診斷與監測的主要方法，它不僅能夠診斷是不是患有糖尿病，還能夠鑒別患者得的是Ⅰ型還是Ⅱ型糖尿病，并對治療和控制效果進行檢測。目前，糖尿病的實驗室檢查主要包括四個方面，分別是葡萄糖水平(血、尿、糖耐量)檢查、胰島素及C肽檢查、糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)檢查和糖尿病相關抗體檢測。
糖化血紅蛋白(GHB)是血紅蛋白與糖類(如葡萄糖、6-磷酸葡萄糖或1.6-二磷酸果糖)經非酶促結合而成的。它的合成過程是緩慢且不可逆的。它積累并持續于紅細胞120天生命期中，合成速率與紅細胞所處環境中糖的濃度成正比。其中，HbA1c約占GHB的60%～70%，且結構穩定。另外，HbA1c在總血紅蛋白中所占的比例能夠反映測定前2～3個月內平均血糖水平。
　　1983年到1993年在美國29所醫學中心通過對1441組病例進行的糖尿病控制和并發癥臨床研究(DCCT)表明了糖尿病患者病程的發展和合并癥與血糖控制的密切關系，還證明了血漿葡萄糖水平與HbA1c之間的關系。DCCT結果表明，控制血糖可以減少合并癥危險，其中可以使糖尿病眼病減少70%，腎病減少50%，神經系統疾病減少60%。
　　在此基礎上，美國糖尿病協會(ADA)提出了糖尿病治療的建議，指明測定HbA1c的重要性，并在全世界范圍內被廣泛應用。

　　存在不同檢測方法
　　GHB檢測用于常規實驗室始于20世紀70年代末期，且穩定發展至今，成為評價血糖控制水平的重要指標。GHB實驗通常檢測由血紅蛋白和葡萄糖經過緩慢過程且非酶促反應所形成的穩定部分。由于紅細胞允許葡萄糖自由滲透，血液樣本中糖化血紅蛋白水平反映過去120天內的平均血糖水平。
　　目前，臨床實驗室中應用的GHB測定方法主要分為兩類：一是基于GHB與非GHB的電荷不同，如離子交換層析、電泳和等電聚集方法；二是基于血紅蛋白上糖化基團的結構特點，如親和層析和免疫實驗。
　　而HbA1c的測定方法則包括離子交換層析、親和層析法和免疫分析。其中，離子交換層析法是基于血紅蛋白β鏈末端纈氨酸糖化后所帶電荷不同而建立的。親和層析法是采用硼化瓊脂糖為載體，利用其與GHB殘基中的葡萄糖特異結合的特性達到分離測定目的。免疫分析依靠針對GHB β鏈N末端4～8個氨基酸的單克隆或多克隆體，結合比色或比濁方法，以糖化蛋白為標準，測定HbA1c的含量。

　　臨床應用需要檢測標準統一
　　但是，離子交換方法會受到如下干擾：胎兒血紅蛋白(HB-F)與HbA1c的帶電性很相近，在離子交換HPLC分析圖上可能呈現一個獨立的Hb-F峰，也可能與HbA1c峰重疊(這要視離子交換柱的分離能力而定)。親和層析的特點是，只要血紅蛋白分子上有糖基化結構，不論它結合在哪個氨基酸上，都能被硼酸鹽親和柱捕捉到。免疫方法受到的干擾，若使用針對β鏈N末端6個氨基酸結構有特異性的單克隆抗體，但對Hb-F的r鏈N末端沒有特異性，因為在6個氨基酸中有3個不一樣，使抗體捕捉不到糖化的Hb-F，使測量值偏低，測量結果依Hb-F的量的多少等比例減少。
　　為此，美國臨床化學協會(AACC)在1993年成立分委會進行GHB的統一測量標準的工作。本項工作由美國國家糖化血紅蛋白統一測量標準計劃(NGSP)指導委員會承擔。該委員會由執行委員會和實驗室網絡組成，其中實驗室網絡包括管理核心、中心參考實驗室、參考實驗室和二級參考實驗室。
該計劃的目的是校準實驗室測定方法，為測定方法和實驗室頒發合格證書，指導常規實驗室開展室間質量評價活動，于1996年完成。
　　通過本項計劃，獲得的主要效益包括兩個方面：首先，臨床實驗室可以通過能力驗證活動獲得，這種活動通常使用由網絡實驗室定值的新鮮血樣本，評估結果的偏差和實驗室間及方法間的可比性；其次，標準方法的使用讓實驗室檢測結果與DCCT的實驗結果結合起來，從而更好地服務于臨床醫生和糖尿病患者。
　　這一工作使得美國臨床實驗室間GHB測定的結果有了很大的變化，據有關資料報道， 2000年，美國90%的實驗室以HbA1c報告GHB的結果；所有參加NGSP活動實驗室測定結果的室間變異系數(CV)小于5%；HbA1c檢測結果與靶值的偏差小于0.8%。目前美國絕大多數實驗室報告的結果都能溯源到DCCT結果，使對糖尿病及其并發癥的治療和預防工作有了統一的參考標準。目前，美國臨床實驗室標準委員會(NCCLS)采納了NGSP的GHB測定的統一測量標準模式。
　　1995年國際臨床化學組織(IFCC)建立了工作組，以研發HbA1c測定的標準物質和標準方法為目的。在其建立的實驗室網絡中，使用純化的HbA1c和HbAO進行校準，并致力于建立與NGSP網絡結果間的聯系。
　　實驗結果顯示，IFCC的HbA1c結果略低于NGSP的結果。而現在，在美國NGSP的中心參考實驗室內也將建立IFCC參考方法。


（選自科學時報2005-4-7，有刪改）

的確是這樣，我在幾個醫院檢查糖化血紅蛋白數據差別比較大，據說是檢測方法不同，應該有統一的標準了。