薄層、氣相以及液相的比較（歡迎大家討論）

　　氣相、液相與薄層都是常用的色譜方法,隨著柱色譜的迅猛發(fā)展,GC與HPLC的應(yīng)用突飛猛進(jìn),逐漸的也深入到普通的實(shí)驗(yàn)室。當(dāng)然作為不同的分離方法,它們都有各自的優(yōu)點(diǎn)與缺點(diǎn),再者各自的適用范圍也不一樣，不過(guò)在下的水平確實(shí)有限,本貼的目的只是拋磚引玉,希望更多的人參與討論。

　　首先說(shuō)說(shuō)三者的原理，大凡熟悉色譜的人都清楚,色譜主要是利用了物質(zhì)之間的物理化學(xué)性質(zhì)的差異,具體到薄層是利用樣品在板與展開(kāi)劑之間分配差異而將不同的樣品定性與半定量的。大多數(shù)薄層與液相上的液固液相色譜比較的相似,當(dāng)然如果在一個(gè)廣義上闡述原理其實(shí)都是利用在固定相與流動(dòng)相分配比的差異進(jìn)行分離的。

　　氣相則是利用氣體在柱上的吸附-解吸系數(shù)的不同來(lái)進(jìn)行分離的。當(dāng)然這只是很直白的分離過(guò)程原理,具體到實(shí)際的情況,我們必須考察液相分離度的因素,即有哪些因素影響了分配比,因?yàn)檫@些因素是我們可以改變的,并且可以使得有更好的分離效果。

　　當(dāng)然這里主要有兩種理論:塔板理論與傳質(zhì)理論。

　　先說(shuō)氣相吧，以填充柱為例簡(jiǎn)明說(shuō)明色譜分離的原理。
　　氣-固色譜分析中的固定相是一種具有多孔性及較大比表面積的吸附劑顆粒。試樣由載氣攜帶進(jìn)入柱子時(shí)，立即被吸附劑所吸附。載氣不斷流過(guò)吸附劑時(shí)，吸附著的被測(cè)組分又被洗脫下來(lái)。這種洗脫下來(lái)的現(xiàn)象稱為脫附。脫附的組分隨著載氣繼續(xù)前進(jìn)時(shí)，又可能被前面的吸附劑所吸附。隨著載氣的流動(dòng)，被測(cè)組分在吸附劑表面進(jìn)行重復(fù)的物理吸附，脫附過(guò)程。由于被測(cè)物質(zhì)中各個(gè)組分的性質(zhì)不同，他們?cè)谖絼┥系奈侥芰筒灰粯樱^難被吸附的組分就容易被脫附，較快的移向前面。容易被吸附的組分就不容易被脫附，向前的速度就慢。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間，即通過(guò)一定量的載氣后，試樣中的各個(gè)組分就彼此分離而先后流出色譜柱　當(dāng)然如果是氣液色譜的話，上述的吸附與脫附就變成溶解與揮發(fā)。

　　感覺(jué)上總是覺(jué)得薄層與液相之間有某種很相似的地方，特別是液-固色譜，只是固定相的形式不一樣，一個(gè)是柱子，另外一個(gè)是平面狀態(tài)的，特別是當(dāng)你用紫外燈顯色的時(shí)候。對(duì)于HPLC 而言主要的是考察要建立一個(gè)快速且分離度較好的方法，但是經(jīng)常改變的也就是流動(dòng)相；我常常在想，做薄層的時(shí)候我們很多選擇展開(kāi)試劑的方法其實(shí)與HPLC 是很一致的。
　
　　當(dāng)然我在這里必須承認(rèn)這兩方面我做的都不是很多，所以希望眾多高手給出你們不凡的見(jiàn)解。

　　薄層與氣相液相比，好象是小巫見(jiàn)大巫。前者操作要簡(jiǎn)單得多，但是說(shuō)簡(jiǎn)單也不簡(jiǎn)單，有時(shí)為得到一個(gè)合適的展開(kāi)劑，也要花比較多的時(shí)間去篩選。在定性分析方面，它快速、靈敏、成本低，確保不被淘汰！

　　首先我覺(jué)得，薄層的分離效率和液相是沒(méi)有辦法比較的，首先從驅(qū)動(dòng)力來(lái)看，薄層其實(shí)主要是利用一個(gè)毛細(xì)管現(xiàn)象,驅(qū)動(dòng)力只是一種表面張力，但是液相是利用一個(gè)高壓的泵。液相會(huì)有一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的流速，覺(jué)得薄層做爬板的時(shí)候其實(shí)速度應(yīng)該不是一個(gè)很確定的值，而且速度會(huì)與流動(dòng)相與固定相之間的性質(zhì)有很大的關(guān)系。

　　當(dāng)我們做液相色譜的時(shí)候，這里說(shuō)的是建立一個(gè)液相的方法，我們首先可以參照通常的一些標(biāo)準(zhǔn)，看看性質(zhì)相近的一些物質(zhì)所采用的方法，包括：檢測(cè)器，柱子，流動(dòng)相，以及相關(guān)的流速，進(jìn)樣量等因素。當(dāng)然所陳述的這么多因素中有些是很好判斷的：對(duì)于有紫外吸收的物質(zhì)我們一般是選用紫外檢測(cè)器；色譜柱選擇起來(lái)也不是很難，常用的C-18柱，或者一些其他常用的柱子如：氨基柱；流速與進(jìn)樣量處理起來(lái)也似乎不是很難。。。。。常常覺(jué)得比較難以選擇還是流動(dòng)相，畢竟對(duì)于比較難以分離的系統(tǒng)來(lái)說(shuō)，流動(dòng)相的選擇涉及到流速（也就是分析時(shí)間）與分離度的問(wèn)題，但是在液相當(dāng)中，對(duì)流動(dòng)相的敏感程度有些時(shí)候又是非常的高，所以導(dǎo)致了液相選擇合適流動(dòng)相的難度。

　　其實(shí)比較一下，我們會(huì)發(fā)現(xiàn)薄層與之真的是非常的相似，首先我們根據(jù)待分離物質(zhì)選擇合適的顯色方式：是利用分子光譜的原理來(lái)進(jìn)行還是利用與某種物質(zhì)反應(yīng)顯色來(lái)鑒別。這里的用紫外燈來(lái)觀察和液相中的紫外檢測(cè)器是何等的相似。

　　再者選定了顯色方式之后就是選擇合適的薄層板，當(dāng)然這里又有是自己鋪板還是買現(xiàn)成的。最后又是煩人的選擇展開(kāi)劑，不得不承認(rèn)，展開(kāi)劑與液相中的展開(kāi)劑有相似之處，但是更多的還是有很多的不一樣。我覺(jué)得這里不一樣的根源其實(shí)是色譜系統(tǒng)的效率問(wèn)題，薄層色譜的效率與液相怎么能比呢？所以液相中的流動(dòng)相的微小變化就會(huì)導(dǎo)致較大的峰型變化。

[ 本帖最后由 yfcl 于 2007-2-2 11:01 編輯 ]

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