生化分析儀是醫院常用的重要儀器設備,生化分析離不開生化分析儀。隨著國民經濟的高速發展,科學技術的不斷進步,以及國家對醫療衛生的特別重視,全自動生化分析儀的應用越來越得到普及推廣,被各級醫療衛生機構廣泛使用。這就為我們計量部門檢定生化分析儀帶來更高的技術要求。
JJG464-1996《生化分析儀檢定規程》相對于全自動生化分析儀的檢定來說,有它一定的局限性,常常會讓檢定員感覺到檢定起來有些困難。筆者下面就全自動生化分析儀吸光度準確度的檢定談一點體會和看法。全自動生化分析儀是以吸光度分析為基礎,具有樣品取樣及加試劑、混合、保溫反應等測定,分析過程監控和數據處理及輸出能力實現全自動化的儀器。我們對全自動生化分析儀進行檢定,就需要對具體儀器的測定計算方法有一定的了解。全自動生化分析儀在各個吸光度讀數點讀取的吸光度數據,并不一定都納入濃度計算。儀器往往根據定義和操作者設定的要求,對吸光度原始數據作計算處理,轉換成反應數據,再按系數或公式作濃度計算。其基本測定方法有終點法和速率法。終點法是根據反應達到平衡時反應產物的吸收光譜特征及其吸光度大小,對物質進行定量分析的方法。在測定計算方式上,一般分為一點法和兩點法兩種。一點終點法是以試劑和樣品混合之前的空氣空白、水空白或試劑空白的吸光度值為測定計算基點,以反應終點的吸光度值減去空白讀數,得到反應吸光度。兩點終點法即終點-始點法,以試劑和樣品混合之后的某一時間點作為始點,以反應終點的吸光度值減去始點讀數。速率法又稱連續監測法,即連續監測反應過程,根據所測定的產物生成或底物消耗的速度進行定量分析的方法。我們對全自動生化分析儀進行計量檢定,就是從儀器工作的最基本的原理著手,來判斷其計量性能是否合格。這其中,吸光度準確度的檢定尤為重要。檢定其吸光度準確度,規程要求用吸光度值為0.5和1.0的生化分析儀吸光度標準物質,在波長為340nm處進行檢測。由于我們用的標準物質吸光度值為定值,這就要求我們在檢定時標物的吸光度值不能發生變化。也就是說標物既不能被稀釋,也不能與試劑發生反應。所以檢定時對儀器的設定非常關鍵。首先要求儀器能直接測定吸光度值(如測定為濃度值,則需要根據公式和系數算出吸光度值),其次要選用340nm波長、一點終點法。然后將吸光度值為0.5和1.0的生化分析儀吸光度標準物質既作樣品又作試劑,分別用儀器測出其吸光度值。測出的吸光度值與標準值之差,應該符合規程要求。由于多數全自動生化分析儀可以在整個反應周期內連續監測(如HITACHI7170常規測定周期10分鐘,監測34點;OLYMPUSAU600固定周期8分15秒,監測27點),所以吸光度重復性可不再單獨測量,可直接由吸光度準確度測量數據得出。
作者:宜昌市計量檢定測試所 萬軍 黃敏 |
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