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計量論壇

標題: 酶標儀使用時為什么要用雙波長？ [打印本頁]

作者: 劉彥剛 時間: 2016-9-21 11:05
標題: 酶標儀使用時為什么要用雙波長？
酶標儀使用時為什么要用雙波長？而檢定時又要用單波長？

作者: gonglex 時間: 2017-2-8 11:04
劉老師我也遇到這個問題，我是這樣考慮的，您看看對不對。我們檢定時用的濾光片的標準值是用分光光度計在固定的波長下檢定得出的，所以在檢定酶標儀的時候是用單波長的。。而酶標儀在使用的時候采用雙波長是為了使數據穩定。。您覺得這個說法對嗎？

作者: 山東宏家 時間: 2018-6-29 09:30
您好：劉老師我想請教一下酶標儀標準值As和標稱值有什么關系嗎？標準值怎嗎得來的。是檢測得來的嗎？

作者: 山東宏家 時間: 2019-7-30 14:40
劉老師請問一下，我們買的是濾光片檢定酶標分析儀，但是老板又買了96孔酶標板，這兩個有關聯嗎？

作者: smile舞狼 時間: 2019-7-30 17:22

山東宏家發表于 2019-7-30 14:40
劉老師請問一下，我們買的是濾光片檢定酶標分析儀，但是老板又買了96孔酶標板，這兩個有關聯嗎？ ...

濾光片要放在96孔酶標板上之后再去校準儀器的，不然你的濾光片固定不到儀器里面去。

作者: vvliu2000 時間: 2019-7-31 17:54
本帖最后由 vvliu2000 于 2019-7-31 17:55 編輯

酶標儀在實際使用中通常采用雙波長形式（即參照波長和檢測波長，有的儀器上也叫主波長和次波長），最顯著的原因就是在于雙波長測定樣本吸光度的準確性、精密度都優于單波長檢測。而實際檢定使用單波長首先是出于所使用的標準物質（中性濾光片）相比實際檢測的被測樣品有更好的均勻性、顏色均勻，幾乎不存在裂紋啊、條紋啊、氣泡或者斑點等干擾因素，也不易受污染和輻射。中性濾光片在一定波長范圍內有相對恒定的吸光度（不像檢測標本一樣存在特點波長的吸收峰），且在檢定點波長處定了值，有著明確的吸光度標稱值。綜上所述，實際檢定采用單波長測定吸光度由于標準物質的干擾遠小于實際樣本，已經能夠較為準確的測量出酶標儀吸光度示值誤差。當通過不同波長各個檢定點的檢定，確定單波長檢測下的吸光度示值誤差符合要求時，使用雙波長進行實際檢測的準確性也能從計量器具本身性能處得到保障。至于實際檢測出來的數據準不準就不好說，實際檢測的空白、陰陽標本對照、樣本處理、試劑等等都對實際檢測結果的準確性產生很大的影響。這也是我們現在除了計量檢定/校準外，醫療機構自身更為重視、也反復強調的質控問題。

作者: 劉彥剛 時間: 2019-8-1 05:50
本帖最后由劉彥剛于 2019-8-1 05:52 編輯

vvliu2000 發表于 2019-7-31 17:54
酶標儀在實際使用中通常采用雙波長形式（即參照波長和檢測波長，有的儀器上也叫主波長和次波長），最顯著的 ...

非常感謝你給我回復！該帖子是我發表于 2016-9-21，后來我經過學習，對該問題有了了解：

從酶標儀光路可知，檢測的光束是垂直經過待測標本的，待測標本的上表面是敝開的，由于表面張力等原因，它不可能是規則平面，這樣檢測用光經過待測樣本的光程難以恒定，自然會使測量精密度差。所以中檔以上的酶標儀，基本上都會采用雙波長比色功能。所謂雙波長功能是指酶標儀在敏感波長如450nm和非敏感波長如630nm（此時樣本測定酶反應特異顯色的吸光度值為零）下各測定一次，取兩次測得值之差為測量結果。這樣能明顯提高測量的準確度和精密度。
而檢定時用單波長，其道理就顯而易見了。

作者: 山東宏家 時間: 2019-8-9 14:17

smile舞狼發表于 2019-7-30 17:22
濾光片要放在96孔酶標板上之后再去校準儀器的，不然你的濾光片固定不到儀器里面去。 ...

濾光片放不進去96孔酶標板啊

作者: NCC757922576 時間: 2019-9-12 16:25

山東宏家發表于 2019-8-9 14:17
濾光片放不進去96孔酶標板啊

買片時候上面有個架子和96孔酶標板一樣大就是用來放濾光片的

作者: wangshixiong 時間: 2020-5-10 13:20

smile舞狼發表于 2019-7-30 17:22
濾光片要放在96孔酶標板上之后再去校準儀器的，不然你的濾光片固定不到儀器里面去。 ...

不對吧，濾光片(有一個固定外殼)能放到96孔板上方？應該是一個專門放濾光片的專用板吧，

作者: 一閃一閃亮星星 時間: 2022-7-15 11:14

gonglex 發表于 2017-2-8 11:04
劉老師我也遇到這個問題，我是這樣考慮的，您看看對不對。我們檢定時用的濾光片的標準值是用分光光度計在固 ...

我覺得這個說法是對的，因為校準檢定的時候使用的標準器溯源是在單波長下的值，所以條件要保持一致吧，這樣誤差才可靠

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